分光光(guāng)度計的結構(gòu)與(yǔ)使(shǐ)用方(fāng)法(fǎ)
更新(xīn)時(shí)間:2012-12-27 點(diǎn)擊量:7583
1.分光光度(dù)法定(dìng)義(yì)與應用
1.1定(dìng)義:分(fēn)光光度(dù)法是(shì)利用物(wù)質(zhì)所(suǒ)*的吸(xī)收(shōu)光譜來鑒別物(wù)質(zhì)或測(cè)定(dìng)其含量的(dí)分(fēn)析(xī)檢測技術(shù).
1.2特點:靈(líng)敏(mǐn),,快(kuài)速和簡便,在復雜組(zǔ)分(fēn)係統中,不需要分離(lí),即能檢(jiǎn)測(cè)出其中(zhōng)所(suǒ)含的(dí)極少量(liáng)物(wù)質.
1.3應用(yòng):生物<>化(huà)學(xué)研究(jiū)中廣泛使(shǐ)用的(dí)方法(fǎ)之一,廣泛(fàn)用(yòng)於糖,蛋(dàn)白質(zhì),核酸(suān),酶等的快(kuài)速定量(liáng)檢測.
2.分(fēn)光(guāng)光度(dù)計的基本結(jié)構和(hé)工(gōng)作(zuò)原理
2.1分(fēn)光光度計的分類
2.2分光光度計(jì)工(gōng)作(zuò)原理(lǐ)
2.3分光(guāng)光(guāng)度計的基本結構
2.4分(fēn)光(guāng)光(guāng)度(dù)法的測量(liáng)誤(wù)差
2.5顯(xiǎn)色(sè)反(fǎn)應及其(qí)影(yǐng)響因素
2.1分(fēn)光光(guāng)度(dù)計的分類(lèi)
分(fēn)光(guāng)光(guāng)度(dù)計(jì)的(dí)分(fēn)類
紅(hóng)外(wài)分(fēn)光光度計(jì):測定(dìng)波長範圍為(wéi)大(dà)於760nm的紅(hóng)外(wài)光(guāng)區
可(kě)見(jiàn)光(guāng)分(fēn)光光度計:測(cè)定波長(cháng)範(fàn)圍(wéi)為400~760nm的(dí)可見(jiàn)光區
紫外分光光度(dù)計:測定(dìng)波(bō)長範(fàn)圍為200~400nm的紫外(wài)光區(qū)
2.2分(fēn)光光度(dù)計工(gōng)作(zuò)原(yuán)理(lǐ)
人(rén)眼可見的光隻(zhī)占電(diàn)磁(cí)波譜(pǔ)的很(hěn)小—部(bù)分(400~760nm)
它是一(yī)種頻(pín)率(shuài)較大的電(diàn)磁波.電(diàn)磁(cí)波(bō)按(àn)頻(pín)率(shuài)大(dà)小(xiǎo),從頻(pín)率zui小的(dí)無綫電波(bō)到(dào)頻率(shuài)zui大的(dí)γ-射(shè)綫排成一(yī)列(liè),即(jí)組(zǔ)成電磁波(bō)的波譜,
2.2.1分光(guāng)光度計(jì)的(dí)光(guāng)譜(pǔ)範(fàn)圍(wéi)
包括(kuò)波長範圍為400~760nm的(dí)可(kě)見(jiàn)光區和波長範圍為(wéi)200~400nm的(dí)紫外光區.不同(tóng)的光(guāng)源(yuán)都有其(qí)*的(dí)發(fā)射光(guāng)譜,因(yīn)此可采(cǎi)用(yòng)不同(tóng)的發光(guāng)體(tǐ)作為儀器(qì)的光(guāng)源.
鎢(wū)燈(dēng)的(dí)發射光(guāng)譜:鎢(wū)燈光源所(suǒ)發出的400~760nm波(bō)長的(dí)光譜(pǔ),光(guāng)通(tōng)過(guò)三(sān)棱鏡折射後,可得到由(yóu)紅,橙,黃,綠(lǜ),藍(lán),靛(diàn),紫組(zǔ)成的(dí)連續色譜;該(gāi)色譜可作為可見(jiàn)光分(fēn)光光度計的光(guāng)源(yuán).
氫(qīng)燈的發(fā)射(shè)光譜:氫燈能發(fā)出185~400nm波長的光(guāng)譜(pǔ),可(kě)作(zuò)為(wéi)紫(zǐ)外(wài)光光(guāng)度計的光源.
2.2.2物(wù)質的(dí)吸收光(guāng)譜(pǔ)(1)
如果在(zài)光(guāng)源和棱(léng)鏡(jìng)之(zhī)間放(fàng)上某(mǒu)種(zhǒng)物(wù)質的溶液(yè),此(cǐ)時在(zài)屏上(shàng)所顯示的光(guāng)譜已(yǐ)不再是光源(yuán)的光(guāng)譜,它(tā)出現(xiàn)了幾(jī)條暗(àn)綫(xiàn),即光(guāng)源(yuán)發射光譜中某些波長的光因(yīn)溶液(yè)吸(xī)收而消(xiāo)失,這種(zhǒng)被(bèi)溶(róng)液吸收(shōu)後的光(guāng)譜稱為(wéi)該(gāi)溶液的(dí)吸收光(guāng)譜.
不(bù)同(tóng)物質(zhì)的(dí)吸收(shōu)光譜是不(bù)同的.因此根(gēn)據(jù)吸收(shōu)光譜,可以(yǐ)鑒(jiàn)別溶液中(zhōng)所含(hán)的(dí)物(wù)質.
2.2.2物質的吸收(shōu)光譜(pǔ)(2)
當(dāng)光(guāng)綫通過某種物質的溶(róng)液(yè)時,透(tòu)過的(dí)光的(dí)強度(dù)減(jiǎn)弱.因為有一(yī)部分光在溶(róng)液(yè)的(dí)表麵(miàn)反(fǎn)射或(huò)分(fēn)散,一部(bù)分(fēn)光(guāng)被(bèi)組成此(cǐ)溶液(yè)的(dí)物質所吸(xī)收(shōu),隻(zhī)有一部分光(guāng)可透(tòu)過(guò)溶液.
入(rù)射光=反射光+分散光+吸(xī)收光+透(tòu)過(guò)光
如(rú)果我(wǒ)們用蒸餾水(shuǐ)(或組(zǔ)成此(cǐ)溶液的溶劑)作(zuò)為(wéi)"空(kōng)白(bái)"去校(xiào)正(zhèng)反(fǎn)射,分散(sàn)等因素造(zào)成的入射光的損失(shī),則(zé):
入(rù)射(shè)光=吸收(shōu)光十(shí)透過(guò)光
2.2.3物質(zhì)吸光度(dù)(A)與(yǔ)透射比(T)的(dí)關(guān)係(xì)
設I0為(wéi)經(jīng)過空(kōng)白(bái)校(xiào)正(zhèng)後(hòu)入(rù)射光的強度;I為(wéi)透(tòu)過(guò)光(guāng)的強(qiáng)度.
根據(jù)實驗(yàn)得(dé)知(zhī)I=I0?10-εcl
式中(zhōng),c表(biǎo)示(shì)吸(xī)收物(wù)質的摩爾(ěr)濃度(dù);l表(biǎo)示(shì)吸收(shōu)物質(zhì)的光徑(jìng),用cm表示(shì);ε表示吸收物質(zhì)的(dí)摩(mó)爾消(xiāo)光(guāng)係數(shù),它(tā)表示(shì)物質(zhì)對光(guāng)的(dí)吸收特性,不(bù)同(tóng)物(wù)質的ε數值不(bù)同(tóng).所(suǒ)以I/I0=10-εcl
令T(透射(shè)比)=I/I0T=10-εcl
若(ruò)以T對(duì)吸收物(wù)質(zhì)的濃度(dù)作圖,則(zé)得圖1-5-2中的(dí)曲綫.
由上(shàng)式可得(dé)1g(1/T)=εcl
lg(l/T)為(wéi)物質(zhì)的(dí)吸光(guāng)度(A)A=1g(1/T)
2.2.4Lambert-Beer定律(E=εcl)
上式說明了(liǎo)物質的(dí)吸光(guāng)度(dù)與(yǔ)吸(xī)收物質的濃度和(hé)液(yè)層(céng)的厚(hòu)度(dù)成正(zhèng)比(bǐ),這就是光(guāng)吸(xī)收的基本(běn)定(dìng)律--Lambert-Beer(朗(lǎng)伯(bó)-比耳)定律.
2.3分光光度(dù)計的基本結(jié)構
無論(lùn)哪(nǎ)一(yī)類分光光(guāng)度計都(dū)包(bāo)括:光源(yuán),單(dān)色(sè)器,吸收池(chí),檢測器(qì)和測(cè)量(liáng)儀表(biǎo).分光光度計各(gè)部件(jiàn)的次(cì)序(xù)如圖所示:
5個基本部件(jiàn)
分(fēn)光光(guāng)度(dù)計的(dí)基(jī)本部件(jiàn)(1):
光(guāng)源:分光(guāng)光度(dù)計(jì)上(shàng)常用的(dí)光源有兩(liǎng)種:鎢絲(sī)燈或氫燈,在可見光(guāng)區(qū),近紫外光區和(hé)近紅外(wài)光區常用鎢絲燈作(zuò)為光(guāng)源(yuán);在紫外(wài)光區多使(shǐ)用氫(qīng)弧(hú)燈.
單色器:把(bǎ)混合(hé)光(guāng)波分解為單(dān)—波長光(guāng)的裝(zhuāng)置(zhì).在分光(guāng)光度計中多用作為色散(sàn)元(yuán)件.
吸收(shōu)池(chí)比(bǐ)色杯,比色皿,比(bǐ)色池)一般由(yóu)玻璃,石英(yīng)或熔凝石(shí)英製(zhì)成,用來盛(shèng)被(bèi)測的(dí)溶液.在低於350nm的紫(zǐ)外(wài)光(guāng)區工(gōng)作時,必(bì)須(xū)采(cǎi)用(yòng)石英池或(huò)熔凝石英池(chí).
分光(guāng)光(guāng)度(dù)計的基本(běn)部件(2):
吸收(shōu)池(比色皿)必須與(yǔ)光束方向垂直.此(cǐ)外(wài),每套比色皿(mǐn)的(dí)質(zhì)料,厚度應*相同(tóng),以(yǐ)免(miǎn)產(chǎn)生誤差.比(bǐ)色皿(mǐn)上的指紋(wén),油汙(wū)或(huò)壁(bì)上的(dí)沉積(jī)物都會顯著地影(yǐng)響其透光性(xìng),因(yīn)此在使(shǐ)用前(qián)務必(bì)*清洗.
常(cháng)用光電池,光(guāng)電管(guǎn)和(hé)光電倍(bèi)增(zēng)管(guǎn)三(sān)種.
測量裝置—般(bān)常(cháng)用的紫(zǐ)外光(guāng)和可見(jiàn)光分(fēn)光光度計有3種測(cè)量(liáng)裝置,即(jí)電流表,記(jì)錄器和數字示值讀數(shù)單(dān)元(yuán).現(xiàn)代(dài)的(dí)儀(yí)器常附有自(zì)動(dòng)記錄(lù)器(qì),可自(zì)動描(miáo)出(chū)吸收曲綫.
檢(jiǎn)測器(qì)
棱(léng)鏡與(yǔ)光(guāng)柵(zhà)
棱鏡:光波通過棱鏡時,不同波長的光折射(shè)率不同;因(yīn)而(ér)能(néng)將(jiāng)不(bù)同波長(cháng)的光(guāng)分開.玻(bō)璃對(duì)紫(zǐ)外綫(xiàn)的(dí)吸(xī)收力(lì)強(qiáng),故玻璃(lí)棱鏡(jìng)多用於(yú)可見(jiàn)光分光光(guāng)度(dù)計(jì).石英(yīng)棱鏡(jìng)可在(zài)整(zhěng)個紫外光區(qū)傳(chuán)播(bō)光(guāng),故(gù)在(zài)紫外(wài)光(guāng)分(fēn)光(guāng)光度計(jì)中(zhōng)廣為應用(yòng).
衍射(shè)光(guāng)柵(zhà):在石(shí)英(yīng)或玻(bō)璃表麵(miàn)上刻(kè)劃許(xǔ)多(duō)平行(háng)綫(xiàn)(每英(yīng)寸約刻15000—30000條).由(yóu)於(yú)刻綫處不透(tòu)光,通(tōng)過光的幹涉(shè)和衍(yǎn)射(shè)使較(jiào)長的光(guāng)波(bō)偏折(zhē)角度大(dà),較短(duǎn)的(dí)光(guāng)波偏折(zhē)角度(dù)小(xiǎo),因而(ér)形成(chéng)光譜.
棱(léng)鏡(jìng)單色器裝(zhuāng)置示意圖(tú)
光源(yuán)照(zhào)到(dào)棱鏡(jìng)(或(huò)光柵(zhà))以前,先要經(jīng)過(guò)一個(gè)入(rù)射狹(xiá)縫(féng),再(zài)通過平(píng)行(háng)光(guāng)鏡使成為(wéi)平行(háng)光束投(tóu)到(dào)棱(léng)鏡上.透(tòu)過(guò)棱(léng)鏡的光再經另一聚光鏡,在(zài)此(cǐ)聚光鏡的(dí)焦(jiāo)麵內可(kě)得一(yī)清楚(chǔ)的光(guāng)譜(pǔ)圖(tú).如(rú)在(zài)焦綫(xiàn)處放—出射狹縫(féng),轉動棱鏡使(shǐ)光譜移(yí)動,就(jiù)可以從出(chū)射狹縫(féng)射(shè)出(chū)所需(xū)要(yào)的單(dān)色光.整個裝置稱(chēng)為"單(dān)色器"
檢(jiǎn)測器---光電池
光電池裝(zhuāng)在一個特製的匣子(zǐ)裏(lǐ)麵由3層物(wù)質(zhì)組(zǔ)成的(dí)圓形(xíng)或長(cháng)方(fāng)形(xíng)薄片(piàn).*層是(shì)一種導電性(xìng)良(liáng)好的(dí)金屬,這(zhè)是光(guāng)電(diàn)池的負極.中間(jiān)極薄的一層是(shì)半導體(tǐ)硒,第3層(céng)是(shì)鐵(tiě),這是光電池的正極.當光電(diàn)池受(shòu)光(guāng)照射以後,半導(dǎo)體(tǐ)硒的表麵逸出電(diàn)子(zǐ),這(zhè)些(xiē)電子隻(zhī)向(xiàng)負極方向移動,而不向正極移動(dòng),因(yīn)此在上下(xià)兩(liǎng)金屬(shǔ)片(piàn)間產生一個電(diàn)位差,綫路連(lián)通(tōng)時(shí)即產生電流
檢測器(qì)---光電(diàn)管(guǎn)
光電(diàn)管(guǎn)光(guāng)電管(guǎn)是由封(fēng)裝(zhuāng)在(zài)真空(kōng)透(tòu)明封(fēng)套(tào)裏(lǐ)的(dí)一個(gè)半圓(yuán)柱型陰(yīn)極(jí)和(hé)一個絲陽極組成(chéng).陰(yīn)極(jí)的凹(āo)畫上(shàng)有一(yī)層(céng)光電(diàn)發(fā)射材料,此種物質經光照射可發射(shè)電(diàn)子.當在兩極(jí)間加(jiā)有電位(wèi)時(shí),發射(shè)出(chū)來(lái)的電子(zǐ)就流向(xiàng)絲(sī)陽極(jí)而(ér)產生(shēng)光電(diàn)流(liú).對於(yú)相(xiāng)同的(dí)輻射強(qiáng)度(dù),它(tā)所產(chǎn)生(shēng)的(dí)電流約(yuē)為(wéi)光電池所產生電(diàn)流的1/4.由(yóu)於(yú)光電(diàn)管(guǎn)具有很高的電阻(zǔ),所(suǒ)以(yǐ)產生(shēng)的電(diàn)流(liú)容易(yì)放大(dà).
檢(jiǎn)測器(qì)---光電(diàn)倍增(zēng)管(guǎn)
光(guāng)電(diàn)倍增管它比普(pǔ)通(tōng)的光(guāng)電(diàn)管*,它可將*次發(fā)射出(chū)的電子(zǐ)數目(mù)放大到數(shù)百(bǎi)萬倍(bèi).當電子打(dǎ)在(zài)兼(jiān)性陽(yáng)極(jí)上時,能引起更多的(dí)電子自表麵射(shè)出.這(zhè)些(xiē)射(shè)出的電子(zǐ)又(yòu)被(bèi)第二(èr)個兼(jiān)性(xìng)陽極所吸引(yǐn),同樣(yàng)再產生更多的電子.
此(cǐ)過程(chéng)重復9次後,每(měi)個(gè)光子可形成106~107個電子(zǐ).這些電子(zǐ)zui後被(bèi)收(shōu)集在(zài)陽極(jí)上(shàng).所得到(dào)的倍(bèi)增電流可進一步(bù)加以放(fàng)大和測(cè)量.
2.4分光(guāng)光度法的測量誤差
分(fēn)光光(guāng)度法的測量(liáng)誤(wù)差
選擇適宜波長(cháng)的入(rù)射光(guāng)
控製吸光度(dù)A的遍(biàn)數範(fàn)圍(wéi)
選(xuǎn)擇適當(dāng)的參比溶(róng)液(yè)
儀器測(cè)
量誤(wù)差
測量(liáng)條
件選擇
2.4.1儀(yí)器測量誤差
由朗(lǎng)伯-比爾(ěr)定律可知(zhī),隻(zhī)有(yǒu)在(zài)一定的濃度範圍(wéi)內,即(jí)一定的吸光度(dù)範圍同內,由(yóu)分光光度計(jì)測量(liáng)所引起的測定結(jié)果(guǒ)的相對(duì)誤(wù)差(chà)才是較(jiào)小的;當透(tòu)光(guāng)率接(jiē)近(jìn)0或(huò)1.0時(shí),其(qí)相對(duì)誤差趨(qū)於(yú)無(wú)限(xiàn)大;一(yī)般(bān)在百分透光(guāng)率在10~80%的(dí)範(fàn)圍內(即吸(xī)光度(dù)在(zài)1~0.1),濃度測量(liáng)相對(duì)誤(wù)差較小(xiǎo);對於精密度(dù)高(gāo)的儀(yí)器(qì).當吸度(dù)A=0.7-0.2時(shí)(百分透光率約(yuē)為20-60%,測量(liáng)誤差約(yuē)為(wéi)1%.
2.4.2測量(liáng)條(tiáo)件(jiàn)選(xuǎn)擇
(1)選(xuǎn)擇(zé)適宜(yí)波(bō)長的入射光(guāng):由(yóu)於有(yǒu)色物質(zhì)對(duì)光有選(xuǎn)擇性吸收(shōu),為(wéi)了使(shǐ)測定結果(guǒ)有較(jiào)高(gāo)的(dí)靈(líng)敏度(dù),必(bì)須選擇(zé)溶液zui大(dà)吸收(shōu)波長的入(rù)射光.
(2)控(kòng)製吸(xī)光(guāng)度(dù)A的準確(què)的(dí)讀(dú)數(shù)範(fàn)圍:由朗伯(bó)-比耳定律可知(zhī),吸光度(dù)隻有控(kòng)製在0.2~0.7讀數(shù)範(fàn)圍內(nèi)時,測量的(dí)準(zhǔn)確(què)度較(jiào)高.
(3)選擇參比溶液:參比(bǐ)溶(róng)液(yè)是(shì)用來調(tiáo)節(jié)儀(yí)器工作零(líng)點的.若(ruò)樣品溶液(yè),試劑(jì),顯(xiǎn)色劑無(wú)無(wú)色(sè)可(kě)用蒸餾(liù)水作參比溶(róng)液(yè);反之(zhī)應采(cǎi)用不(bù)加顯色(sè)劑的樣品(pǐn)液作參比溶液(yè).
2.5顯色反(fǎn)應及(jí)其影響因(yīn)素(sù)
顯(xiǎn)色(sè)反應及(jí)其(qí)影響(xiǎng)因素(sù)
顯(xiǎn)色(sè)反應
一般要(yào)求
影(yǐng)響(xiǎng)顯色(sè)
反應(yīng)因素
選擇性(xìng)好(hǎo)
靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
生(shēng)成(chéng)的(dí)有(yǒu)色化合物性(xìng)質穩定
顯(xiǎn)色劑(jì)與有(yǒu)色(sè)物(wù)顏(yán)色反差(chà)大
顯色反應要(yào)易於(yú)控製
顯色(sè)劑用量
反(fǎn)應液的(dí)酸鹼度(pH)
反(fǎn)應(yīng)溫度(dù)
顯(xiǎn)色(sè)反應時(shí)間(jiān)
幹(gān)擾(rǎo)離子的(dí)影響
2.5.1顯色反(fǎn)應一般要求
(1)選(xuǎn)擇(zé)性好(hǎo):顯色劑(jì)隻與(yǔ)一(yī)種(zhǒng)被測組(zǔ)分起顯(xiǎn)色(sè)反(fǎn)應;
(2)靈敏(mǐn)度高(gāo):靈敏度高(gāo)有笪(dá)微(wēi)量(liáng)組(zǔ)分的測定;
(3)有色(sè)化合(hé)物(wù)性質(zhì)穩定:確(què)保前(qián)後測(cè)定準確(què).
(4)顯色(sè)劑與有色(sè)物(wù)顏(yán)色反(fǎn)差大:兩(liǎng)者zui大吸收波(bō)長(cháng)之差(chà)應大(dà)於(yú)60nm;
(5)顯色反應(yīng)要(yào)易於(yú)控(kòng)製:結(jié)果的(dí)確(què)保實驗(yàn)再現性.
2.5.2影(yǐng)響(xiǎng)顯(xiǎn)色反(fǎn)應(yīng)的主要因(yīn)素
(1)顯色劑用量:通過實(shí)驗(yàn)來確(què)定(dìng)zui適用量;
(2)反(fǎn)應(yīng)液(yè)的酸鹼度(pH)溶(róng)液(yè)酸(suān)鹼(jiǎn)度直接(jiē)影響金屬離(lí)子(zǐ)與(yǔ)顯色劑存(cún)在(zài)形式以(yǐ)及有色(sè)化合(hé)物(wù)組成的(dí)穩(wěn)定(dìng)性.
(3)反(fǎn)應溫度:不同(tóng)的顯(xiǎn)色(sè)反應(yīng)需要(yào)不同的反(fǎn)應溫度(dù),一(yī)般顯(xiǎn)色(sè)反(fǎn)應可(kě)在(zài)室溫下(xià)完成.
(4)顯色(sè)反(fǎn)應時(shí)間:顯色(sè)反(fǎn)應的(dí)速度(dù)有快(kuài)有慢.
(5)幹擾(rǎo)離(lí)子的影響:應(yīng)采用適(shì)當(dāng)方法(fǎ)消除其影響.
3.7200型分光(guāng)光(guāng)度計的(dí)正(zhèng)確使(shǐ)用(yòng)方法(fǎ)
3.1結(jié)構和(hé)工作原理(lǐ)
3.1.1儀(yí)器(qì)結構
3.1.2工(gōng)作原(yuán)理(lǐ)
3.1.3特點(diǎn)
3.2使用(yòng)方法(fǎ)
3.3注(zhù)意事項(xiàng)
3.1.17200型分(fēn)光光(guāng)度(dù)計(jì)儀(yí)器結構(gòu)
7200型光柵分光光(guāng)度(dù)計由光源,單(dān)色器(qì),試樣室(shì),光電管(guǎn),綫性運算放(fàng)大器(qì),對數運(yùn)算(suàn)放(fàng)大器(qì)及(jí)數字顯(xiǎn)示(shì)器(qì)等(děng)部件組成,基(jī)本結構如(rú)下(xià)圖所示.
1.光源;2.單色(sè)器;3.試樣(yàng)室;4.光電(diàn)管;5.綫(xiàn)性運(yùn)算放大器;6.對數運算(suàn)放大器(qì);7.數字顯示器
3.1.27200型分(fēn)光(guāng)光度計工作(zuò)原(yuán)理(lǐ)(圖)
7200型(xíng)光柵分(fēn)光光(guāng)度計(jì)光學(xué)係統(tǒng)示(shì)意圖
1.光(guāng)源燈;2.濾光片;3.球麵(miàn)反射(shè)鏡(jìng);4.入射(shè)狹(xiá)縫(féng);5.保(bǎo)護玻璃(lí);6.平麵反射(shè)鏡(jìng);7.準(zhǔn)直鏡(jìng);8.光柵;9.保護玻璃;10.出射狹(xiá)縫(féng);11.聚光(guāng)鏡;12.試樣(yàng)室;13.光(guāng)門;14.光電管;
3.1.27200型(xíng)分(fēn)光(guāng)光度計工(gōng)作原(yuán)理(lǐ)(文(wén))
由(yóu)光(guāng)源(yuán)燈(1)發(fā)出連續輻(fú)射光(guāng)綫,經(jīng)濾光(guāng)片(2)和(hé)球麵反射鏡(jìng)(3)至(zhì)單色(sè)器的入(rù)射(shè)狹(xiá)縫(4)聚焦成(chéng)像(xiàng),光束通過入射狹縫(4)經平(píng)麵反射(shè)鏡(6)到準直(zhí)鏡(7)產生平行(háng)光(guāng),射(shè)至光柵(8)上色(sè)散後又(yòu)以準直(zhí)鏡(7)聚焦在(zài)出(chū)射狹(xiá)縫(10)上形成一連(lián)續(xù)光(guāng)譜,由(yóu)出射(shè)狹縫選擇射出一定(dìng)波(bō)長的單色(sè)光,經(jīng)聚(jù)光鏡(11)聚光後,通過(guò)試樣(yàng)室(shì)(12)中的(dí)測試(shì)溶液部分吸收(shōu)後,光(guāng)經(jīng)光門(13)再照射(shè)到光(guāng)電(diàn)管(14)上(shàng).調(tiáo)整(zhěng)儀器(qì),使透(tòu)光(guāng)度為100%,再(zài)移動試樣架(jià)拉手,使同一(yī)單色(sè)光(guāng)通過測試溶液後照射到光電管上(shàng).如果被(bèi)測樣(yàng)品(pǐn)有(yǒu)光吸(xī)收現象(xiàng),光量減(jiǎn)弱,由(yóu)光(guāng)電轉換元(yuán)件將變(biàn)化(huà)的(dí)光信號轉變為(wéi)電(diàn)信號,經綫(xiàn)性運(yùn)算(suàn)放大(dà)器和對數(shù)運算放(fàng)大器處理(lǐ),將(jiāng)光能(néng)的(dí)變(biàn)化程度通過(guò)數(shù)字(zì)顯(xiǎn)示(shì)器顯(xiǎn)示出(chū)來.可(kě)根據需要(yào)直(zhí)接(jiē)在數(shù)字(zì)顯示器上(shàng)讀(dú)取(qǔ)透光度(T),吸光(guāng)度(dù)(A)或(huò)濃度(C).
3.1.3特點(diǎn)
(1)具(jù)有低雜色(sè)光(guāng),高分(fēn)辯率的(dí)單光束光(guāng)路結構的(dí)單色器(qì);
(2)具有良(liáng)好的穩定性,重現性(xìng)和(hé)的測量讀(dú)數;
(3)明亮清晰(xī)的數字顯(xiǎn)示器(qì)可顯(xiǎn)示透(tòu)射比(bǐ),吸(xī)光(guāng)度(dù),濃(nóng)度(dù)和(hé)所(suǒ)設(shè)置(zhì)的波長,提高了(liǎo)儀器的(dí)讀(dú)數準確性(xìng);
(4)采用微機處理(lǐ)技術,儀器具有(yǒu)自動(dòng)設(shè)置0%T和100%等控製功(gōng)能;
(5)儀器(qì)配有(yǒu)標準的(dí)RS-232雙向(xiàng)通訊接口,不(bù)僅可(kě)向(xiàng)計算(suàn)機(jī)發送測試(shì)參(cān)數,還(huán)可接收計算機發(fā)出(chū)的(dí)指令(líng).
(6)在已知標(biāo)準溶液濃(nóng)度前提下(xià),測定未知(zhī)樣(yàng)品(pǐn)濃(nóng)度(dù);
(7)在已(yǐ)知(zhī)標(biāo)準溶液(yè)濃度(dù)斜率前(qián)提下(xià),測(cè)定(dìng)未知樣品(pǐn)濃度(dù).
3.27200型(xíng)分光(guāng)光(guāng)度計(jì)使(shǐ)用方法(fǎ)(基(jī)本(běn)操(cāo)作(zuò)1)
3.2.1基(jī)本操作(zuò)
(1)通電(diàn)---儀器自檢(jiǎn)----預熱20min;
(2)用鍵設置(zhì)測(cè)試方式:透射比(T),吸(xī)光度(dù)(A),已(yǐ)知標樣濃度(dù)方(fāng)式(C)和已知標樣(yàng)濃度(dù)斜率(K)方式;
(3)波(bō)長選擇:用(yòng)波長調(tiáo)節(jié)旋(xuán)鈕(niǔ)設置所需的單色(sè)光波長;
(4)放樣順序(xù):打開樣(yàng)品室(shì)蓋(gài),在1~4號(hào)放(fàng)置比色皿槽(cáo)中(zhōng),依次(cì)放(fàng)入(rù)%T校具(jù)(黑體(tǐ)),參比液,樣品(pǐn)液1和樣品液2.
(5)校具(jù)(黑(hēi)體)校"0.000":將(jiāng)%T校(xiào)具(jù)(黑(hēi)體(tǐ))置入(rù)光路,在T方式下按"%T"鍵,此時(shí)儀器(qì)自動校正(zhèng)後顯示"0.000"
(6)參比(bǐ)液(yè)校"100"%T或"0.000"A:將參比(bǐ)液(yè)拉入光路中,按"0A/100%T"鍵(jiàn)調0A/100%T,此時儀器顯示(shì)"BLA",表(biǎo)示儀器正(zhèng)在自動(dòng)校正(zhèng),校正完(wán)畢後(hòu)顯(xiǎn)示"100"%T或"0.000"A後(hòu),表(biǎo)示校(xiào)正完畢,可以(yǐ)進行(háng)樣品(pǐn)測定.
(7)樣品測定(dìng):將兩樣品(pǐn)液分別拉(lā)入光路(lù)中,此(cǐ)時(shí)若在"T"方(fāng)式(shì)下(xià)則可依次(cì)顯(xiǎn)示樣(yàng)品(pǐn)的透(tòu)射比(bǐ)(透光度)若在(zài)"A"方式下(xià),則顯示測(cè)得的樣品吸(xī)光度.
3.27200型分(fēn)光光(guāng)度計(jì)使(shǐ)用(yòng)方法(濃度測定)
7200型分光光度(dù)儀不(bù)僅可以測(cè)定未知樣品的透射(shè)比(bǐ)(T)和(hé)吸光度(A)這兩(liǎng)項基本操作(zuò),還可進(jìn)行(háng)未(wèi)知(zhī)樣品濃度(dù)測(cè)定.
(1)在已(yǐ)知標準溶(róng)液濃(nóng)度前(qián)提下(xià),測定未知樣品濃(nóng)度.
(2)在已知標準溶液濃(nóng)度斜率(shuài)前(qián)提(tí)下,測定未知樣品(pǐn)濃(nóng)度.
備(bèi)注(zhù):以上(shàng)兩種濃(nóng)度(dù)測(cè)定的方(fāng)法請(qǐng)大家參照實驗教學教(jiào)材課後自學.
3.37200型(xíng)光柵(zhà)分光光(guāng)度(dù)計的使用(yòng)注(zhù)意事(shì)項(1)
(1)預熱是保證儀(yí)器準確(què)穩定(dìng)的(dí)重(zhòng)要步驟(zhòu).
(2)比色(sè)皿的清(qīng)潔(jié)程度,直接影響實(shí)驗(yàn)結果.因(yīn)此,特(tè)別要將(jiāng)比(bǐ)色皿清洗(xǐ)幹淨.先用(yòng)自來(lái)水(shuǐ)將(jiāng)用過的(dí)比色(sè)皿反復衝(chōng)洗(xǐ),然後(hòu)用蒸(zhēng)餾水淋(lín)洗,倒立於(yú)濾紙(zhǐ)片上(shàng),待幹(gān)後再(zài)收回比色(sè)皿(mǐn)盒中(zhōng).必(bì)要(yào)時,還(huán)要對比色皿(mǐn)進行(háng)更(gēng)精細的(dí)處(chǔ)理,如(rú)用濃硝(xiāo)酸或鉻(gè)酸(suān)洗(xǐ)液浸泡,衝(chōng)洗.
(3)比色皿與(yǔ)分光光(guāng)度計應配套使用,否(fǒu)則會(huì)引起較大的(dí)實驗誤(wù)差(chà).比(bǐ)色(sè)皿不(bù)能單個調換
3.37200型光柵分(fēn)光(guāng)光度(dù)計的(dí)使用(yòng)注意事項(2)
(4)比色皿內(nèi)盛液應為其(qí)容量的2/3,過少(shǎo)會影(yǐng)響(xiǎng)實驗結(jié)果,過(guò)多易在測量過程中外溢(yì),汙染儀器(qì).比色皿中(zhōng)試(shì)樣(yàng)裝入量(liáng)應為2/3~3/4之間
(5)拿放比(bǐ)色(sè)皿(mǐn)時(shí),應持(chí)其"毛(máo)麵",杜(dù)絕接觸(chù)光路通過(guò)的"光(guāng)麵".如比色皿外表麵有液體(tǐ),應用(yòng)綢(chóu)布拭(shì)幹(gān),以(yǐ)保證光路(lù)通過時不(bù)受影響.
(6)若待測液濃度過(guò)大,應選(xuǎn)用短光徑(jìng)的比(bǐ)色皿,一(yī)般應(yīng)使(shǐ)吸(xī)光度(dù)讀數(shù)處於(yú)0.1~0.8範圍(wéi)內為宜.由於(yú)測(cè)定空白,標(biāo)準和待測(cè)溶(róng)液時使用同(tóng)樣光徑(jìng)的比色皿,故(gù)不必(bì)考(kǎo)慮因光徑變(biàn)化(huà)而(ér)引(yǐn)起(qǐ)的影響.
4.UV-754型紫外(wài)-可(kě)見(jiàn)分(fēn)光光度計(jì)正確使用方法
4.1紫(zǐ)外分光(guāng)光(guāng)度法(fǎ)概(gài)述
4.2UV-754型(xíng)紫(zǐ)外(wài)-可(kě)見(jiàn)分光(guāng)光(guāng)度計(jì)結(jié)構(gòu)和(hé)工(gōng)作原理
4.1.1儀(yí)器結構
4.1.2工作原(yuán)理(lǐ)
4.3UV-754型(xíng)紫外(wài)-可見(jiàn)分(fēn)光光(guāng)度計使用方法
4.4UV-754型(xíng)紫外(wài)-可(kě)見分(fēn)光光度計使(shǐ)用注意事(shì)項
4.1紫(zǐ)外(wài)分光光度計(jì)法(fǎ)概(gài)述(shù)(1)
4.1.1定(dìng)義用紫外(wài)光源通過(guò)分(fēn)光(guāng)光度技(jì)術對(duì)物質(zhì)進(jìn)行測定的方(fāng)法叫作紫外分(fēn)光光度(dù)法.所(suǒ)使(shǐ)用的(dí)儀器叫(jiào)作紫外(wài)分(fēn)光(guāng)光(guāng)度(dù)計(jì).
4.1.2原理因為許(xǔ)多(duō)化(huà)合(hé)物(wù)的(dí)分(fēn)子結構中存在共(gòng)軛雙(shuāng)鍵(jiàn),在(zài)200~400nm的(dí)紫外光(guāng)區具(jù)有(yǒu)吸(xī)收光(guāng)的(dí)特(tè)性(xìng),所以無(wú)需(xū)進行顯(xiǎn)色(sè)反(fǎn)應(yīng)便能(néng)直接(jiē)測(cè)定.
4.1.3應(yīng)用(yòng)常(cháng)用於對蛋白(bái)質和(hé)核(hé)酸進(jìn)行(háng)定性(xìng),定量(liáng)測定.蛋白(bái)質(zhì)分子中所含(hán)酪(lào)氨(ān)酸(suān),色氨酸(suān)和苯(běn)丙(bǐng)氨(ān)酸等芳(fāng)香族氨基(jī)酸(suān)殘基在波長(cháng)280nm處具(jù)有(yǒu)zui大(dà)吸收峰.故常用(yòng)波長(cháng)280nm處的(dí)吸光度測定蛋白(bái)質(zhì)的(dí)濃度.
4.1.4特點
(1)組成核酸(suān)的鹼(jiǎn)基也含有(yǒu)共軛(è)雙鍵,其zui大吸收(shōu)峰(fēng)的波長在260nm處(chǔ).但在(zài)280nm處(chǔ)也(yě)有一定的(dí)光吸收(shōu),對蛋(dàn)白(bái)質的測(cè)定有(yǒu)一定的幹擾(rǎo)作用(yòng).若(ruò)分別測(cè)定(dìng)280nm和260nm處(chǔ)的吸光度(dù),可通(tōng)過(guò)經(jīng)驗公(gōng)式消(xiāo)除(chú)核(hé)酸對蛋白(bái)質(zhì)測(cè)定的影(yǐng)響.
(2)可(kě)對微量(liáng)蛋白(bái)質(1~10g/L)不需顯色,進行直(zhí)接(jiē)定(dìng)量(liáng)測定(dìng).因此操作(zuò)簡便,而(ér)且可回收(shōu)樣(yàng)品(pǐn).此(cǐ)外,鹽類(lèi)在280nm處無光(guāng)吸(xī)收(shōu),少量鹽類也不會影(yǐng)響(xiǎng)測(cè)定(dìng)結果.
(3)紫外(wài)分光(guāng)光度法*符合Lambert-Beer定(dìng)律的(dí)基本原理(lǐ).在其(qí)它條(tiáo)件保持(chí)一致的情況下(xià),被(bèi)測(cè)溶液(yè)的吸(xī)光(guāng)度與被(bèi)測(cè)溶(róng)液的(dí)濃度成(chéng)正比.
4.2UV-754型(xíng)分光光度計(jì)的(dí)結構和工作(zuò)原理
4.2.1儀器結(jié)構(gòu)由(yóu)光源(yuán)(鎢(wū)燈或氚(chuān)燈),單(dān)色(sè)器(qì),試樣室(shì),接受器(qì)(光電(diàn)管),微(wēi)電流放(fàng)大器(qì),A/C轉換(huàn)器,打印機,鍵(jiàn)盤和(hé)顯示器(qì)等部(bù)件(jiàn)組成.微(wēi)處(chǔ)理機(CPU)通過(guò)輸入(rù),輸(shū)出口(I/O)對微電(diàn)流(liú)放(fàng)大(dà)器,顯示(shì)器和(hé)打印機(jī)等(děng)部(bù)件進行(háng)控製,實現儀器的整(zhěng)體(tǐ)功能(néng).
4.2.2工作原(yuán)理(圖(tú))
UV-754型(xíng)紫(zǐ)外-可見分(fēn)光(guāng)光度(dù)計(jì)光學係(xì)統(tǒng)示(shì)意圖(tú)
1.氚(chuān)燈(dēng);2.鎢(wū)燈(dēng);3.濾光鏡;4.聚(jù)光(guāng)鏡(jìng);5.入射狹縫;6.平麵(miàn);7.準直(zhí)鏡;8.光(guāng)柵(zhà);9.出射狹縫(féng);10.聚光(guāng)鏡;11.試(shì)樣室(shì);12.光(guāng)門;13.光電管
4.2.2工(gōng)作原(yuán)理(文)
由光源氚(chuān)燈或鎢(wū)燈(1或2)發出連(lián)續輻(fú)射光(guāng)綫經(jīng)濾(lǜ)光鏡(3)和(hé)聚(jù)光(guāng)鏡(4)至單(dān)色器入(rù)射狹(xiá)縫(féng)(5)處聚焦成像(xiàng),再經(jīng)平麵反射鏡(6)反射至準直(zhí)鏡(7)產(chǎn)生(shēng)平(píng)行(háng)光射至光柵(zhà)(8)在(zài)光柵上(shàng)色(sè)散(sàn)後又經準直(zhí)鏡(7)聚(jù)焦在出射狹縫(9)上(shàng)成一(yī)連(lián)續(xù)光譜,經出射狹縫射出(chū)的光在(zài)聚光鏡(10)聚(jù)光後分(fēn)別通(tōng)過試樣(yàng)室(shì)(11)中的空白溶液(yè)(或(huò)對照溶(róng)液),標準(zhǔn)溶液(yè)或(huò)樣品溶液(yè),被(bèi)部分(fēn)吸收後光經光門(12)再(zài)照(zhào)射(shè)到光電(diàn)管(guǎn)(13)上.被光(guāng)電(diàn)管(guǎn)接收的光(guāng)信(xìn)號再被轉換成電信號(hào),後(hòu)者通過(guò)輸(shū)入,輸(shū)出(chū)口(kǒu)(I/O),見上圖.進(jìn)入微(wēi)處(chǔ)理機(jī)進行調(tiáo)零(líng),變換(huàn)對(duì)數(shù),濃(nóng)度(dù)計算以及打印數據(jù)等處理(lǐ),將檢測結(jié)果(guǒ)通過顯(xiǎn)示器和打印係(xì)統顯(xiǎn)示(shì)出(chū)來.
4.3UV-754型分光(guāng)光(guāng)度(dù)計使(shǐ)用(yòng)方法(fǎ)(外型)
4.3.1UV-754型紫外可(kě)見(jiàn)分光(guāng)光(guāng)度計的(dí)外(wài)觀圖
1.試(shì)樣架拉手;2.鍵盤部(bù)分;3.數據(jù)打印;4.波(bō)長刻度(dù)盤(pán);5.波(bō)長(cháng)手輪;6.電源汗(hàn)關;7.氚燈觸發(fā)按鈕;8.光源室.
4.3UV-754型分光光度計(jì)使(shǐ)用方(fāng)法(鍵(jiàn)盤(pán))
UV-754型(xíng)紫(zǐ)外(wài)-可見分光光(guāng)度(dù)計(jì)的(dí)鍵(jiàn)盤(pán)示(shì)意(yì)圖(tú)
鍵盤詳細內容說明如下(xià):
4.3UV-754型分(fēn)光光度(dù)計使用(yòng)方(fāng)法(fǎ)(鍵盤內(nèi)容(róng)1)
①功能鍵(jiàn):F1~F8,暫無(wú)功能(néng),備擴(kuò)展(zhǎn)使用.
②T鍵:具有(yǒu)三(sān)種(zhǒng)透光度狀(zhuàng)態調節功能.
③A/C鍵:吸光(guāng)度(dù)/濃(nóng)度轉換鍵,按(àn)此(cǐ)鍵(jiàn)可分(fēn)別(bié)表示"吸光度(dù)0~3A","吸光度(dù)0~0.lA","吸光度0~0.1A"和"濃度(dù)"四(sì)種狀(zhuàng)態.
④送入鍵(jiàn):隻在"A/C鍵(jiàn)"處(chǔ)於"濃度"狀態時才起作(zuò)用(yòng).
⑤打(dǎ)印鍵:手動(dòng)方式時有效,每按一次,便打(dǎ)印(yìn)一次數(shù)據.
⑥控(kòng)製(zhì)鍵:在(zài)分別(bié)使用"設定(dìng)+","設(shè)定一(yī)","倍率","顯示方式"和(hé)"打印方(fāng)式(shì)"各鍵(jiàn)時,需與(yǔ)控(kòng)製鍵分別聯合(hé)使用才起作用.
⑦設(shè)定(dìng)+鍵:在"A/C鍵"處於"濃(nóng)度"狀態(tài)時(shí)才(cái)能(néng)設(shè)定"標(biāo)準(zhǔn)濃度值","斜率K值(zhí)"或(huò)"斜率B值"等(děng)數(shù)據.其功能是(shì)將(jiāng)設(shè)定數(shù)值增加.
4.3UV-754型(xíng)分(fēn)光光(guāng)度(dù)計(jì)使用方(fāng)法(鍵盤內容(róng)2)
⑧設定-鍵:是(shì)使設定數值(zhí)減(jiǎn)小,操(cāo)作(zuò)與"設定+鍵(jiàn)"類同.
⑨倍(bèi)率(shuài)鍵:用來設定標(biāo)準(zhǔn)溶液濃(nóng)度(dù)的放大倍(bèi)數.有(yǒu)"1","0.1"和"0.01"三檔,與"控製鍵"同(tóng)時按(àn)下,倍(bèi)率(shuài)便(biàn)發生(shēng)相應的變化(huà).
⑩顯(xiǎn)示(shì)方(fāng)式(shì)鍵:可(kě)表示(shì)"積(jī)分","濃度"和"樣品號"三(sān)種狀態.
(11)打印方式(shì)鍵:存(cún)在"自動"(每(měi)移動(dòng)一次試(shì)樣(yàng)架,儀(yí)器自(zì)動打印(yìn)一次(cì)數據(jù)),"方式1"(手動(dòng)方式,每(měi)按(àn)一次此鍵,儀器打(dǎ)印(yìn)一次數據)和"方(fāng)式(shì)2"(每分鐘(zhōng)定時打印(yìn)一次數據(jù))三(sān)種狀態.每(měi)與"控製鍵"同(tóng)時(shí)按一次(cì)此鍵便改(gǎi)變一個狀態.
(12)送紙鍵(jiàn):每(měi)按(àn)一次此鍵(jiàn),儀器移(yí)動(dòng)一(yī)次打印(yìn)紙.
(13)TAC:數字(zì)顯(xiǎn)示器顯示測(cè)定結(jié)果或(huò)輸入(rù)的(dí)數(shù)據(jù).
4.3.2UV-754型(xíng)紫(zǐ)外可見分光(guāng)光度(dù)計使用方法(1)
(1)測(cè)試準備
①將(jiāng)盛(shèng)有"空白"或"對照"溶液的比色(sè)皿(mǐn)處(chǔ)於試(shì)樣(yàng)室(shì)光路(lù)位(wèi)置;
②選(xuǎn)擇(zé)波長(cháng)旋(xuán)動(dòng)波(bō)長手(shǒu)輪選定(dìng)所需波(bō)長;
③確定光源(yuán)波(bō)長在200~290nm時(shí),選擇氚燈為光(guāng)源;波長(cháng)在290~360nm時,同(tóng)時(shí)以氚燈(dēng)和(hé)鎢燈(dēng)為光源(yuán);波長在360~850nm時(shí),選擇鎢燈為光源;若使用氚燈,需按(àn)氚(chuān)燈(dēng)觸發(fā)按(àn)鈕(niǔ)啟(qǐ)動;
④儀(yí)器(qì)自(zì)檢顯示(shì)器顯示"754"後(hòu),數字顯示出現"100.0",表(biǎo)明(míng)儀器通過(guò)自(zì)檢程(chéng)序,此時(shí)儀器進入(rù)"0~100%","連續"和"自動"狀態(tài)(打印係統處於自動打印(yìn)狀(zhuàng)態(tài))
⑤儀器預熱30min後(hòu)方(fāng)可(kě)進(jìn)行測試.
4.3.2UV-754型紫外(wài)可見分(fēn)光光度計使用方(fāng)法(2)
(2)測試過程
①數(shù)字(zì)顯(xiǎn)示透光度(dù)"100.0"(或(huò)吸(xī)光(guāng)度"0.00")2~3s後,將盛(shèng)有(yǒu)標準溶(róng)液(yè)的比色皿移(yí)至光(guāng)路,打印係統(tǒng)便(biàn)自(zì)動打印(yìn)出(chū)所(suǒ)得數(shù)據(jù);
②將(jiāng)盛有(yǒu)樣品溶液的比色(sè)皿移至(zhì)光(guāng)路(lù),打(dǎ)印係(xì)統(tǒng)即自動打印出該樣(yàng)品的數(shù)據(jù).待*個樣(yàng)品(pǐn)數據打(dǎ)印完(wán)畢後(hòu),將(jiāng)第(dì)二(èr)個(gè)樣(yàng)品置於試樣室(shì)光路………,若有多(duō)個樣品,操作(zuò)以此類(lèi)推(tuī).
(3)打(dǎ)印(yìn)方(fāng)式
采(cǎi)用"自動"方式(shì)打(dǎ)印(yìn),依(yī)所選(xuǎn)定表達方式(shì)可打印出以下數(shù)據(jù):No(編號)%T(透光度)或(huò)ABS(吸(xī)光度)或CONC(濃(nóng)度(dù))
4.4UV—754型(xíng)紫外—可見分光光度計(jì)注(zhù)意事項
(1)預熱(rè)是(shì)保證(zhèng)實(shí)驗結(jié)果(guǒ)準(zhǔn)確可(kě)靠(kào)的(dí)必要步(bù)驟(zhòu),不(bù)可(kě)忽略.
(2)在(zài)波(bō)長320nm以下(xià)的實驗範圍(wéi)一定(dìng)要選(xuǎn)用(yòng)石英(yīng)比(bǐ)色(sè)皿(mǐn),絕不(bù)可以玻璃(lí)比色(sè)皿(mǐn)替代.
(3)比色皿(mǐn)需保持(chí)清(qīng)潔(jié),拿(ná)放時要符合(hé)要(yào)求.
(4)對(duì)不同型號和類型(xíng)的(dí)儀(yí)器要嚴格按(àn)照使(shǐ)用說明(míng)操作.
(5)UV-754型紫(zǐ)外-可見(jiàn)分光光(guāng)度計(jì)還(huán)可開展"以校(xiào)正綫(xiàn)進(jìn)行(háng)濃度演(yǎn)算(suàn)"和(hé)"用已(yǐ)知斜(xié)率K值與B值(zhí)進行(háng)濃(nóng)度(dù)測定"等(děng)多種測試(shì)方(fāng)法(fǎ).
(6)不同(tóng)蛋白(bái)質所含酪氨酸,色氨(ān)酸和(hé)苯丙氨酸的數量(liáng)有所(suǒ)差(chà)異,此(cǐ)法對不同(tóng)蛋白(bái)質洋品的(dí)測(cè)定結果有(yǒu)所影響